Avaliação da especificidade da NESTED-PCR em relação aos Oligonucleotídeos S35, S36 E S67 utilizados na detecção do kDNA de Trypanosoma Cruzi em amostras de sangue de pacientes chagásicos crônicos
A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é uma enfermidade que ainda representa um grave problema de saúde pública. Seu diagnóstico é realizado com base nos aspectos clínicos, epidemiológicos e em testes laboratoriais. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é, dentre os testes...
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| Format: | Online |
| Language: | Portuguese |
| Published: |
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
2016
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://econtents.sbu.unicamp.br/eventos/index.php/simtec/article/view/10317 |
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| Summary: | A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é uma enfermidade que ainda representa um grave problema de saúde pública. Seu diagnóstico é realizado com base nos aspectos clínicos, epidemiológicos e em testes laboratoriais. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é, dentre os testes, uma técnica com alta sensibilidade e especificidade, tendo como alvo o kDNA do T. cruzi. O objetivo do trabalho foi avaliar a Nested-PCR com iniciadores específicos para a região do kDNA, afim de evitar resultados falsos-positivos devido à infecção causada por outros parasitas da ordem Kinetoplastida. Amostras de pacientes chagásicos crônicos sorologicamente positivos e amostras sorologicamente positivas para Leishmania sp. foram submetidas a extração do DNA, reação de amplificação do gene da beta-globina humana e à Nested-PCR. Os iniciadores utilizados para a Nested-PCR foram os S35/S67 para a 1 reação e S35/S36 para a 2 reação. Comprovou-se uma especificidade de 100% dos oligonucleotídeos, pois nenhuma amplificação inespecífica com DNA de Leishmania sp. foi observada e sim amplificações específicas do kDNA de T. cruzi., sendo assim, os oligonucleotídeos testados foram considerados específicos para o diagnóstico da doença de Chagas pela Nested-PCR. |
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| ISSN: | 2525-5398 |
